在生物药物领域，与抗体的组合形成始终是R＆D人员在生产抗体药物期间的一个问题。混合物不仅降低了药物的有效性，而且还可以引发免疫反应，这严重影响了药物的安全性和有效性。现在，Borgron将与您分享有关各种色谱介质去除组合抗体的能力的研究，希望为您提供一些有益的参考。研究的背景 - 合并的 - 通常与疏水区暴露，二硫键异构化和分子间结构域交换抗体分子的交换有关。这些合并的-IS含量很高，细胞培养产量不仅降低了抗体药物的生物活性，而且还会损害免疫反应。鉴于这些结合 - 很难被传统的清洁方法完全消除赋予良好的去除合并的方法 - 同样的方法对于提高抗体药物的质量很重要。在这项研究中，研究人员选择了八种不同类型的色谱培养基，包括疏水相互作用（HIC）色谱培养基，羟基磷灰石（HA）色谱培养基和混合-a -A -A -AROMOMOTOGRAY MEDEA模式，并进行了聚合物 - 在摩尼拉负抗体（MAB）中进行聚合物的聚合物测试。在实验中，抗体最初是通过蛋白A和阴离子交换（AEX）色谱法清洁的，以获得含有几乎合并的14％合并的中间产物。随后，在各种色谱条件下评估了这些色谱介质的Kakayathe聚合物去除。实验方法·色谱柱：所有填充剂均封闭在直径为0.66 cm的床位和15厘米的床高度。使用多种缓冲液形式进行色谱实验。 ·分析IS方法：SEC-HPLC，使用Tooh Tskgel G3000SWXL不锈钢柱进行审查，将样品体积的100μg样品，1.0ml/min流量，移动相，移动相为50mm磷酸盐和300mm氯化钠，pH 6.8。实验结果1。疏水相互作用色谱（HIC）增加了上部样品中的高盐浓度，随着单体流经（FT）的流动，将聚合物扎合。在FT中，聚合物水平降低了1％，表明HIC色谱法在去除聚合物方面具有很高的效率。对于疏水色谱法，尽管配体是相同的，但是不同材料的疏水填充剂可能具有不同的疏水性表现，并且样品的盐浓度要求也可能有所不同。因此，有必要为不同样品选择适当的结合和洗脱条件，以实现聚合物分离的完美作用。 2。羟基磷灰石（HA）在该实验中通过羟基磷灰石FI清洁了MABller绑定模式。结果表明，钠盐梯度洗脱的使用优于磷酸盐梯度洗脱。在洗脱缓冲液中添加PEG可以显着改善分离的效果。这表明添加PEG可以增强与列的结合保存，从而实现更好的分离。 3。混合模式树脂色谱法使用高分辨率阳离子混合色谱介质模式将洗脱模式与pH 5.5结合，并使用盐梯度线性洗脱来实现高纯度单体洗脱，但是洗脱峰具有尾随现象。使用精氨酸酸梯度洗脱可以改善分离的效果。它表明精氨酸可以有效地破坏组合介质和色谱介质之间的相互作用，从而改善分离的效果。阳离子混合模式色谱介质具有相同配体和较大晶粒尺寸的影响不如SA下的约会效果我的条件，但是添加钉可以改善打架的影响。这表明添加PEG可以增强合并后的维护，从而实现更好的分离。色谱培养基的高阴离子模式在pH 7.0下运行，并使用线性精氨酸梯度进行洗脱以实现高纯度单体洗脱，但是洗脱峰尾部的纯度较低。添加钉子可以增加强烈的纯度，但会增加洗脱量。最终，可以使用阶梯精氨酸洗脱并调整适当的PEG梯度来实现高纯度和少量单体。 4。在通常的线性盐梯度色谱法下阳离子交换色谱（CEX），CEX色谱法无法有效分离单体和聚合物。但是，在洗脱缓冲液中添加PEG可以显着改善分离的影响，分别分开单体和聚合物，并保持通过进一步开发逐步洗脱程序，产品的质量并承受果实。它表明，添加PEG可以显着改善CEX色谱分离的效果。基本结论1。许多色谱介质HIC和HA填充剂的有效性显示了强大的聚合物的强大能力。混合物 - 色谱介质模式还对去除聚合物的去除效果也很大。 2。钉的重要作用。在清洁过程中添加PEG和/或精氨酸可以显着改善分离的影响，尤其是在CEX色谱中。添加钉子可以单独分开单体和聚合物。 3.每个填充物的工作参数，需要在实验中确定最佳操作参数，以实现最大的聚合物去除和单体恢复。在大规模生产中，与线性梯度洗脱相比，步骤洗脱对于减少处理时间和洗脱的数量更为愉快。 t中的相关产品介绍抗体清洁的ERMS，选择合适的色谱培养基很重要。如果您正在进行基础研究或工业生产，我们的填充物可以为您提供可靠的解决方案。欢迎咨询以获取更多详细信息！参考文献：Zhang X，Chen T，Li Y.各种抗体树脂的平行显示 - 与案例研究通过能力去除。蛋白质和清洁的表达。 2019; 153：59-69。 doi：10.1016/j.pep.2018.08.011。关于Borglobin borglobin的关于Borglobin，成立于2008年。它是一种专门用于提供优质色谱介质进行隔离和清洁的高科技。它是中国最早能够大规模分离和清洁媒体的业务之一。提供的Borgron提供的产品包括亲和色谱，离子交换色谱，凝胶过滤色谱，疏水色谱和多模态层。不同类型的媒体清洁，例如检查和反相色谱法，A以及安装的列，色谱的空柱，用于细胞培养的微载体，还为开发分离和清洁过程以及填充定制服务提供服务。这些产品和服务被广泛用于许多领域，例如抗体清洁，疫苗清洁，胰岛素清洁，质粒清洁和转向蛋白质。 #antibody纯化＃色谱介质＃Borgron＃色谱填充＃隔离＃（语句：本文是Borgrron和版权的原始文章。